इलेक्ट्रोफोरोसिस एक प्रयोगशाला तकनीक है जो अणुओं को उनके आकार और विद्युत आवेश के अनुसार अलग करने के उद्देश्य से की जाती है ताकि रोगों का निदान किया जा सके, प्रोटीन अभिव्यक्ति को सत्यापित किया जा सके या सूक्ष्मजीवों की पहचान की जा सके।
वैद्युतकणसंचलन एक सरल और कम लागत वाली प्रक्रिया है, जिसका उपयोग प्रयोगशाला दिनचर्या और अनुसंधान परियोजनाओं में किया जाता है। उदाहरण के लिए, एक निदान तक पहुंचने के लिए, इलेक्ट्रोफोरेसिस के उद्देश्य के अनुसार, अन्य परीक्षणों और परीक्षाओं को करना आवश्यक हो सकता है।
ये किसके लिये है
इलेक्ट्रोफोरोसिस कई उद्देश्यों के लिए किया जा सकता है, अनुसंधान परियोजनाओं और निदान दोनों में, क्योंकि यह एक सरल और कम लागत वाली तकनीक है। इस प्रकार, वैद्युतकणसंचलन किया जा सकता है:
- वायरस, कवक, बैक्टीरिया और परजीवी की पहचान करें, इस एप्लिकेशन के अनुसंधान परियोजनाओं में अधिक सामान्य होने के साथ;
- पितृत्व जांच;
- प्रोटीन की अभिव्यक्ति की जांच करें;
- म्यूटेशन की पहचान करें, उदाहरण के लिए, ल्यूकेमिया के निदान में उपयोगी होना;
- सिकल सेल एनीमिया के निदान में उपयोगी होने, हीमोग्लोबिन के परिसंचारी के प्रकारों का विश्लेषण;
- रक्त में मौजूद प्रोटीन की मात्रा का आकलन करें।
वैद्युतकणसंचलन के उद्देश्य के अनुसार, निदान को पूरा करने के लिए डॉक्टर के लिए अन्य पूरक परीक्षण करना आवश्यक हो सकता है।
कैसे किया जाता है
वैद्युतकणसंचलन करने के लिए यह आवश्यक है कि जेल, जो कि यूवी या एलईडी प्रकाश उपकरणों के अलावा, इलेक्ट्रोफोरोसिस बफर और वैट, आणविक भार मार्कर और एक फ्लोरोसेंट डाई के आधार पर पॉलीक्रैलेमाइड या एग्रोस हो सकता है, को ट्रांसिल्यूमिनेटर के रूप में भी जाना जाता है।
जेल तैयार करने के बाद, जेल में कुओं को बनाने के लिए एक विशिष्ट वस्तु को रखा जाना चाहिए, जिसे लोकप्रिय रूप से कंघी कहा जाता है, और जेल को सेट होने दें। जब जेल तैयार हो जाता है, तो पदार्थों को कुओं पर लागू करें। इसके लिए, एक आणविक भार मार्कर को कुओं में से एक में रखा जाना चाहिए, एक सकारात्मक नियंत्रण, जो पदार्थ है जो ज्ञात है कि यह क्या है, एक नकारात्मक नियंत्रण है, जो प्रतिक्रिया की वैधता की गारंटी देता है, और नमूनों का विश्लेषण किया जाना है। सभी नमूनों को एक फ्लोरोसेंट डाई के साथ मिलाया जाना चाहिए, क्योंकि इस तरह से ट्रांसिल्युमिनेटर पर बैंड की कल्पना करना संभव है।
नमूनों के साथ जेल को वैद्युतकणसंचलन वैट में रखा जाना चाहिए, जिसमें विशिष्ट बफर समाधान होता है, और फिर डिवाइस चालू होता है ताकि विद्युत प्रवाह हो और, संभावित अंतर, जो कणों के पृथक्करण के लिए महत्वपूर्ण है उनके लोड और आकार के लिए। इलेक्ट्रोफोरेटिक रनिंग समय प्रक्रिया के उद्देश्य के अनुसार बदलता रहता है, और 1 घंटे तक चल सकता है।
निर्धारित समय के बाद, ट्रांसिल्यूमिनेटर के माध्यम से चलने वाले इलेक्ट्रोफोरेटिक के परिणाम को देखना संभव है। जब जेल को यूवी या एलईडी लाइट के नीचे रखा जाता है, तो बैंड पैटर्न की कल्पना करना संभव है: जितना बड़ा अणु, उतना ही कम यह माइग्रेट करता है, कुएं के करीब हो रहा है, जबकि हल्का अणु, अधिक से अधिक प्रवासी क्षमता।
मान्य किए जाने वाले रिएक्शन के लिए, यह आवश्यक है कि सकारात्मक नियंत्रण के बैंड की कल्पना की जाए और नकारात्मक नियंत्रण में कुछ भी कल्पना न की जाए, अन्यथा यह संकेत देता है कि संदूषण है, और पूरी प्रक्रिया को दोहराया जाना चाहिए।
वैद्युतकणसंचलन के प्रकार
विभिन्न प्रयोजनों के लिए वैद्युतकणसंचलन किया जा सकता है और, इसके उद्देश्य के अनुसार, कई प्रकार के जेल का उपयोग किया जा सकता है, सबसे आम है पॉलीक्रैलेमाइड और agarose।
सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए वैद्युतकणसंचलन अनुसंधान प्रयोगशालाओं में किया जाना अधिक आम है, हालांकि, नैदानिक प्रयोजनों के लिए, वैद्युतकणसंचलन का उपयोग हेमेटोलॉजिकल रोगों और बीमारियों की पहचान करने के लिए किया जा सकता है जो प्रोटीन की मात्रा में वृद्धि के साथ विकसित होते हैं, जो मुख्य प्रकार के वैद्युतकणसंचलन हैं:
1. हीमोग्लोबिन वैद्युतकणसंचलन
हीमोग्लोबिन इलेक्ट्रोफोरेसिस एक प्रयोगशाला तकनीक है जो रक्त में घूमने वाले विभिन्न प्रकार के हीमोग्लोबिन की पहचान करने के लिए की जाती है, जिससे हीमोग्लोबिन संश्लेषण से संबंधित रोगों की उपस्थिति की पहचान करना संभव हो जाता है। एक विशिष्ट पीएच में वैद्युतकणसंचलन के माध्यम से हीमोग्लोबिन के प्रकार की पहचान की जाती है, आदर्श रूप से 8.0 और 9.0 के बीच, बैंड के एक पैटर्न को सत्यापित किया जाता है जिसकी तुलना सामान्य पैटर्न से की जा सकती है, जिससे असामान्य हीमोग्लोबिन की उपस्थिति की पहचान की जा सकती है।
इसके लिए क्या किया जाता है: हीमोग्लोबिन वैद्युतकणसंचलन हीमोग्लोबिन संश्लेषण से संबंधित बीमारियों की जांच और निदान करने के लिए किया जाता है, जैसे कि सिकल सेल एनीमिया और हीमोग्लोबिन सी रोग, अलग-अलग थैलेसीमिया में उपयोगी होने के अलावा। हीमोग्लोबिन वैद्युतकणसंचलन की व्याख्या करना सीखें।
2. प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन
प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन एक परीक्षा है जो डॉक्टर द्वारा रक्त में घूम रहे प्रोटीन की मात्रा का आकलन करने के लिए और इस प्रकार, रोगों की पहचान करने के लिए अनुरोध की जाती है। यह परीक्षण एक रक्त के नमूने से किया जाता है, जिसे प्लाज्मा, रक्त के भाग का गठन किया जाता है, प्रोटीन द्वारा अन्य पदार्थों के बीच।
इलेक्ट्रोफोरेसिस के बाद, बैंड के एक पैटर्न की कल्पना की जा सकती है और बाद में, एक ग्राफ जिसमें प्रोटीन के प्रत्येक अंश की मात्रा को इंगित किया जाता है, निदान के लिए मौलिक है।
इसके लिए क्या किया जाता है: प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन, चिकित्सक को मल्टीपल मायलोमा, निर्जलीकरण, सिरोसिस, सूजन, यकृत रोग, अग्नाशयशोथ, ल्यूपस और उच्च रक्तचाप की घटना की जांच करने की अनुमति देता है बैंड पैटर्न और परीक्षा रिपोर्ट में प्रस्तुत ग्राफ के अनुसार।
समझें कि यह कैसे किया जाता है और प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन के परिणाम को कैसे समझा जाए।
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ग्रन्थसूची
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- केएएसवीआई। वैद्युतकणसंचलन क्या है और यह महत्वपूर्ण क्यों है?। में उपलब्ध: । 24 सितंबर 2019 को एक्सेस किया गया
